دوره 16، شماره 3 - ( پاییز 1391 )                   جلد 16 شماره 3 صفحات 11-18 | برگشت به فهرست نسخه ها

XML English Abstract Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Molaee N, Abtahi H, Mossayebi G. Expression of recombinant streptokinase (SKA) of group A streptococci in E. coli. J Qazvin Univ Med Sci. 2012; 16 (3) :11-18
URL: http://journal.qums.ac.ir/article-1-1323-fa.html
مولایی ندا، ابطحی حمید، مسیبی قاسم. بیان استرپتوکیناز نوترکیب استرپتوکک گروهA در باکتری اشرشیاکلی. مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی قزوین. 1391; 16 (3) :11-18

URL: http://journal.qums.ac.ir/article-1-1323-fa.html


دانشگاه علوم پزشکی اراک ، Email: h_abtahi2@yahoo.co.uk
چکیده:   (6454 مشاهده)

  زمینه: استرپتوکیناز A از جمله پروتئین­های ترشحی استرپتوکک پیوژن است که قدرت آنتی­ژنیک دارد . از این پروتئین می­توان جهت سیال کردن چرک در ذات­الریه و ورم مفصلی چرکی و همچنین به عنوان آنتی­ژن برای تشخیص عفونت­های استرپتوککی گروه A استفاده کرد.

  هدف: مطالعه به منظور تولید استرپتوکیناز استرپتوکک گروه A نوترکیب در باکتری اشرشیاکلی انجام شد.

  مواد و روش­ها: در این تحقیق تجربی با طراحی پرایمر اختصاصی و استفاده از روش PCR ، ژن استرپتوکیناز A از استرپتوکک پیوژن تکثیر و در ناقل پلاسمیدی pET32a جهت بیان کلون شد . پلاسمید SKA - pET32a وارد اشریشیاکلی سویه BL21-DE3-plySs شد. تولید پروتئین با القا توسط IPTG و بهینه­سازی شرایط انجام شد. پروتئین نوترکیب با کیت Ni-NTA خالص و مقدار پروتئین نوترکیب تولید شده با روش برادفورد اندازه­گیری شد. آزمایش وسترن بلات برای تأیید پروتئین نوترکیب انجام شد . ترادف نوکلئوتیدی ژن تکثیر شده با روش سنگر تعیین شد.

  یافته­ها: ترادف ژن تکثیر شده که در پلاسمید pTZ57R/T کلون شده بود با ترادف ثبت شده برای ژن استرپتوکیناز A در بانک ژن، یکسان بود. مقدار پروتئین تولید شده با استفاده از روش برادفورد 3 میلی­گرم بر میلی­لیتر به دست آمد. پروتئین استرپتوکیناز نوترکیب تولید شده با سرم موش واجد آنتی استرپتوکیناز A واکنش داد. پروتئین تولید شده وزنی در حدود 67 کیلو دالتون داشت و خاصیت آنتی­ژنیک خود را به خوبی حفظ کرد.

  نتیجه­گیری: بیان پروتئین نوترکیب استرپتوکیناز A در میزبان اشرشیاکلی نیز امکان­پذیر است. بنابراین می­توان از آن در تشخیص بیماران مبتلا به عفونت­های استرپتوککی گروه A به جای آزمایش­های آنتی­استرپتولایزین O (ASO) و استرپتولایزین O ( SLO ) استفاده کرد.

 

متن کامل [PDF 288 kb]   (1934 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: میکروب شناسی

ارسال نظر درباره این مقاله : نام کاربری یا پست الکترونیک شما:
CAPTCHA code

ارسال پیام به نویسنده مسئول


کلیه حقوق این وب سایت متعلق به مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی قزوین می باشد.

طراحی و برنامه نویسی : یکتاوب افزار شرق

© 2018 All Rights Reserved | The Journal of Qazvin University of Medical Sciences

Designed & Developed by : Yektaweb