دوره 18، شماره 2 - ( دو ماهنامه خرداد و تیر 1393 )                   جلد 18 شماره 2 صفحات 4-11 | برگشت به فهرست نسخه ها

XML English Abstract Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Moghadasi M, Ilghari D, Gheibi N, Sirati-Sabet M, Khabbaz F, Piri H. Expression, purification and evaluation of the recombinant human fibroblast growth factor receptor 2b kinase domain. J Qazvin Univ Med Sci. 2014; 18 (2) :4-11
URL: http://journal.qums.ac.ir/article-1-1595-fa.html
مقدسی معصومه، ایلغاری داریوش، غیبی نعمت اله، سیرتی ثابت مجید، خباز فرهاد، پیری حسین. بیان، تخلیص و بررسی عملکرد ناحیه‏ کینازی گیرنده‏ نوترکیب عامل رشد فیبروبلاستی 2bانسانی. مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی قزوین. 1393; 18 (2) :4-11

URL: http://journal.qums.ac.ir/article-1-1595-fa.html


1- دانشگاه علوم پزشکی قزوین
2- ، d.Ilghari@gmail.com
چکیده:   (5110 مشاهده)

 زمینه: گیرنده عامل رشد فیبروبلاستی 2b ( FGFR2b ) در مسیر پیامرسانی سلولی و تنظیم فرایندهای مهم زیستی از جمله تمایز و تکثیر سلولی نقش اساسی دارد. تغییرات ژنتیکی نظیر جهش نقطهای در ناحیه­ تیروزین کینازی FGFR2b با سرطان پستان، تخمدان و رحم در ارتباط است.

  هدف: مطالعه به منظور بیان و خالصسازی مقدار مناسبی از ناحیه کینازی FGFR2b انسانی انجام شد.

  مواد و روش‏ها: این مطالعه تجربی در سال 1392 در دانشگاه علوم پزشکی قزوین انجام شد. پلاسمید pLEICS-01 که حاوی ژن ناحیه تیروزین کینازی پروتئین نوترکیب FGFR2b بود به باکتری مستعد اشرشیاکلی BL21 جهت بیان ژن مورد نظر انتقال داده شد. بیا ن پروتئین نوترکیب با استفاده از IPTG یک میلیمولار القا و با استفاده از الکتروفورز روی ژل پلیآکریل آمید در حضور SDS ( SDS-PAGE ) ارزیابی شد. پروتئین بیان شده با استفاده از کروماتوگرافی میل ترکیبی توسط ستون حاوی Ni2+-NTA خالص شد. فعال بودن نمونه پروتئین بعد از دیالیز توسط تعامل با ناحیه­ SH2 فسفولیپاز C (PLC) طبیعی و موتان توسط روش PAGE بررسی شد. داده­ها با آزمون­های آماری واریانس یک طرفه و توکی تحلیل شدند.

  یافته‏ها: بررسی SDS-PAGE قبل و بعد از القا شدن نشان داد که پروتئین بیان شده در دمای 20 درجه سانتی­گراد محلول بود. همچنین بررسی SDS-PAGE تأیید کرد که پروتئین خالص شده عاری از آلودگی بود و پروتئین­های باکتریایی نداشت. نتایج PAGE فعال بودن پروتئین خالص شده را تأیید کرد.

  نتیجه‏گیری: باتوجه به یافته­ها، ناحیه کینازی گیرنده نوترکیب عامل رشد فیبروبلاستی 2b که یک پروتئین 38 کیلودالتونی است، تولید و خالص شد که به صورت محلول و فعال بود.

 

 

 

متن کامل [PDF 757 kb]   (1334 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: بیوتکنولوژی

ارسال نظر درباره این مقاله : نام کاربری یا پست الکترونیک شما:
CAPTCHA

ارسال پیام به نویسنده مسئول


کلیه حقوق این وب سایت متعلق به مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی قزوین می باشد.

طراحی و برنامه نویسی : یکتاوب افزار شرق

© 2019 All Rights Reserved | The Journal of Qazvin University of Medical Sciences

Designed & Developed by : Yektaweb